Nous avons identifié les deux seconds messagers c-di-GMP et cAMP comme étant impliqués dans la régulation ExlA. Nous avons démontré que, comme observé avec le T3SS, la voie CyaB-cAMP/Vfr contrôle positivement exlBA en soulignant les similitudes dans le mécanisme de régulation des deux principaux facteurs de virulence de
P. aeruginosa [14]. Pour expliquer les faibles niveaux d'expression d’exlBA, une bibliothèque de mutants transposons a été créée dans une souche portant la fusion transcriptionnelle
in situ exlBA::lacZ. Ce criblage à l'échelle du génome a permis d'identifier un nouveau régulateur que nous avons nommé ErfA (
ExlA Regulatory Factor A), appartenant à la famille des facteurs de transcription de type XRE (
Xenobiotic Response Element). Nous avons confirmé que son inactivation augmentait fortement la cytotoxicité du mutant envers les cellules épithéliales et dans un modèle d'infection
Galleria. Le gène
erfA est conservé dans différents
Pseudomonas sp, même chez ceux qui ne possèdent pas l'opéron
exlBA. Les approches à l'échelle du génome (RNAseq et ChIPseq) ont démontré que l'erfA contrôle également un opéron de deux gènes de fonction inconnue,
ergAB (gènes A et B régulés par l'erfA). Des criblages phénotypiques et la métabolomique sont en cours pour identifier les voies métaboliques exactes où ErfA/ExlA rentre en jeu
[15].
Trouillon
et al (2020)
Nucleic Acids Res.
Références
[14] Berry
et al (2018)
Journal of bacteriology 200(12).
[15] Trouillon
et al (2020)
Nucleic Acids Res. pii: gkz1232. doi: 10.1093/nar/gkz1232